甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒
乙：植物组织→形成愈伤组织→长芽→生根→试管苗
丙：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品
丁：剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养
据此分析错误的是（ ）
（一）某科研小组尝试从自然发酵的泡菜中分离纯化优良乳酸菌，并对其进行产酸能力、生长能力和亚硝酸盐降解能力的测定，以挑选最优菌种。下表为该小组制作的提取分离乳酸菌的培养基配方，其中溴甲酚绿遇酸变黄。
水 | 牛肉膏 | 蛋白胨 | 酵母膏 | 番茄汁 | 葡萄糖 | 吐温 | 碳酸钙 | 溴甲酚绿 |
100mL | 1g | 1g | 1g | 20g | 1g | 0.05mL | 1.7g | 0.01g |
请回答下列问题：
（二）面对新冠疫情，最常见的检测方法是新冠病毒核酸检测，原理为实时荧光定量PCR（RT—PCR）检测法，技术流程如下图所示，①②③表示相关步骤。请回答：
（一）石油污染导致海洋生物多样性严重下降，科学家利用生物工程，对自然界存在的能够分解石油的细菌进行改造，从而获得分解石油能力更强的菌种。
A.PCR技术的原理涉及DNA半保留复制、碱基互补配对和DNA热变性等
B.PCR技术扩增目的基因时，以引物和模板链形成的双链区为起点
C.dNTP 为PCR反应过程提供原料和能量
D.PCR技术需要设计两种碱基序列互补的特异引物
Ⅰ.为快速分离产淀粉酶的枯草杆菌，可将土样用制成悬液，再将含有悬液的三角瓶置于80℃的中保温一段时间，其目的是。
Ⅱ.为提高筛选效率，可将菌种的过程与菌种的产酶性能测定一起进行：将上述悬液稀释后涂布于淀粉为唯一碳源的固体培养基上培养，采用显色方法，根据透明圈与菌落直径比值的大小，可粗略估计出菌株是否产酶及产酶性能。
Ⅲ.为了获得高产淀粉酶的枯草杆菌，可利用现有菌种，通过后再筛选获得，或利用转基因、等技术获得。
Ⅳ.在用农杆菌侵染的方法进行植物转基因过程中，通常要使用抗生素，其目的一是抑制生长，二是筛选转化细胞。当选择培养基中抗生素浓度时，通常会出现较多假阳性植株，因此在转基因前需要对受体进行抗生素的检测。
Ⅴ.为提高培育转基因植株的成功率，植物转基因受体需具有较强的能力和遗传稳定性。对培养的受体细胞遗传稳定性的早期检测，可通过观察细胞内形态是否改变进行判断，也可通过观察分裂期染色体的，分析染色体组型是否改变进行判断。
Ⅵ.植物转基因受体全能性表达程度的高低主要与受体的基因型、培养环境、继代次数和长短等有关。同时也与受体的取材有关，其中受体为时全能性表达能力最高。
Ⅰ.为获取具有较强发酵能力的酵母菌，科研人员将普通酵母菌用紫外线照射等方法进行处理，选择在低温条件上能大量繁殖的酵母菌分别接种于等量的葡萄糖培养液中，然后置于低温、条件下培养。一段时间后，取适量发酵液离心，取与相应的显色剂反应后，用光电比色法测定酒精含量，从而选择高活性的菌种制成干酵母。
Ⅱ.在超净工作台中，将耐低温的高活性干酵母置于适宜温度的溶液中，待酵母悬液中出现气泡后，加入包埋介质制备成固定化酵母菌，最后用无菌水清洗以除去。用固定化酵母菌能明显缩短果酒发酵时间的原因是固定化使，形成酵母菌密度较高的发酵环境，从而加快反应速度。
Ⅲ.果酒在醋杆菌的作用下可转为果醋。将果酒、水、醋杆菌等混合液倒入发酵瓶时，不能让发酵瓶中有游离液体存在的主要目的是。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、嗅之外，还可以通过检测作进一步的鉴定。
Ⅳ.构建重组质粒是基因工程的核心，此过程通常需要和DNA连接酶等工具酶。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有一段包含报告基因的T－DNA序列，因该片段能进入植物细胞并，从而使其携带的目的基因的遗传遵循孟德尔定律。
Ⅴ.图中筛选1的目的是。农杆菌转化愈伤组织的过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，会导致未转化的愈伤组织可能在含除草剂的培养基中生长。因此，进行筛选2时，应在培养基中加，并挑选的愈伤组织细胞，用于植物组织培养。
Ⅵ.将单个转化的愈伤组织细胞置于适当的液体培养基中，经过适当配比的诱导，可发育成胚状体，最后发育成完整的植株。此过程始终要在适宜温度、适宜培养基及等条件下进行。
Ⅰ.绿色荧光蛋白基因在该实验中是基因。图中过程①②形成重组质粒时，需要用到的工具酶是。
Ⅱ.过程③将重组质粒导入猪胎儿成纤维细胞时，采用最多、最有效的技术是。
Ⅲ.依据GFP的特性，该蛋白在生物工程中的应用价值是（填字母）。
A、作为标记蛋白，研究细胞的转移
B、作为标记基因，研究基因的表达
C、注入肌肉细胞，繁殖发光小白鼠
D、标记噬菌体外壳，示踪DNA路径
Ⅳ.重组细胞经过、胚胎培养和后直接由受体诞下转基因克隆猪。为了繁殖更多后代，可以通过技术，产生同卵多仔。
①大麦种子发芽，释放淀粉酶；②加热杀死种子胚但不使淀粉酶失活；③将干燥的麦芽碾磨成麦芽粉；④糖化并过滤得麦汁；⑤麦汁蒸煮；⑥加入酵母菌，发酵；⑦过滤，77℃保温30分钟；⑧过滤、分装啤酒进行出售
请回答：
Ⅴ.大麦种子萌发过程中，受细胞分裂素、等激素的影响，后者可促进淀粉酶的形成，便于动员贮藏的养分。
Ⅵ.流程④若利用一定量的麦芽本身所含的酶进行糖化，则影响糖化的主要因素除pH、温度等环境因素外，还有（写出1点即可）。流程⑤麦汁蒸煮的目的除了杀菌外，还能，从而稳定麦汁组分，保证最终产品的质量。流程⑥在加入酵母菌前为避免高温杀死菌种，需将麦汁进行。
Ⅶ.生产过程中需对啤酒酵母进行质量检测，包括出芽率、耐酒精度、细胞数等。检测不同发酵阶段的酵母细胞数可采用的方法有、。为使酵母可长时间连续使用、提高设备利用率、发酵条件易于控制，生产上可以对酵母菌进处理。
Ⅷ.可在相关标准范围内，加入适量的添加剂——单宁、硅胶、鱼胶等，改善啤酒的泡沫、风味和非生物稳定性并使啤酒澄清。此外，可使用提高其澄清度。
Ⅰ.在自然界中可以从某些微生物如等中获得果胶酶。在葡萄果汁生产中，用果胶酶处理显著增加了产量，其主要原因是果胶酶水解果胶使
Ⅱ.用如图装置制作葡萄酒，在酒精发酵的过程中，需对气阀进行关闭。比色法测定葡萄酒中的酒精含量：首先用和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管，用比色计测定后，绘制出标准曲线，再分别吸取等量经脱色处理的葡萄酒，加入，得到样品管，用比色计测得，最后计算得到酒精含量。
Ⅲ.在生产葡萄酒时由于操作不当，发现葡萄酒变酸。在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜，其形成原因是
Ⅳ.为了降低葡萄醋的生产成本，可对发酵菌进行处理。
Ⅰ.用对小鼠进行皮下注射可诱导小鼠发生相应的特异性免疫反应。
Ⅱ.无菌取小鼠脾脏，提取脾细胞后可使用效率很高的技术使其与骨髓瘤细胞融合。
Ⅲ.利用筛选出杂交瘤细胞并进行培养。通过抗体检验筛选阳性细胞系，经过多次，获得可稳定分泌抗HBP单克隆抗体的杂交瘤。
Ⅳ.若要使能产生抗HBP单克隆抗体的杂交瘤细胞大量增殖，通常采用的方法是。单克隆抗体的研发成功解决了普通抗血清的问题。
材料与用具：AMLC 悬液、BMSC悬液、细胞培养液、过氧化氢（ROS促进剂）、谷胱甘肽（ROS抑制剂）、血细胞计数板、显微镜、培养瓶等。（说明：具体操作和检测方法不做要求。）
①取培养瓶若干，随机均分为四组，标号A、B、C、D组（每组有多个重复培养瓶），分别加入适量且等量的细胞培养液和AMLC细胞悬液；
②，并测定各组AMLC中线粒体的数量；
③A组不作处理，B组加入适量且等量BMSC细胞悬液，
④在相同且适宜的环境下培养，每隔一定时间重复步骤②；
⑤
①AMLC 是骨髓中异常增殖和分化的一种细胞，人体消灭它主要依靠免疫。培养液中加入适量的胰岛素有利于AMLC的增殖，原因是
②为了有利于上述实验的进行，可对细胞（填“AMLC”或“BMSC”）的线粒体DNA进行荧光标记。
（一）有文章称单位面积手机表面的细菌比马桶按钮上的多。某校甲、乙两研究性学习小组通过如图所示实验展示调查结果。
I．研究人员将某细菌的抗虫基因C转入棉花细胞内，成功获得了抗虫转基因棉花，在一定程度上减少了杀虫剂的使用，减少了环境污染，提高了作物的产量和质量。
提取某细菌总RNA，经逆转录形成互补的DNA（cDNA），再利用PCR技术选择性扩增C基因的cDNA，PCR过程中DNA先后经历高温变性→复性→延伸过程，故反应体系中需加入酶。Ⅱ．基因编辑技术（CRISPR/Cas9技术）是一种对靶向基因进行特定DNA修饰的技术，其原理是由一个向导RNA（sgRNA）分子引导Cas9蛋白到一个特定的基因位点进行切割（如图）。请据图回答：
实验材料：人胃癌细胞系、生理盐水、1.5μmol/L药物Y、细胞培养液、培养瓶等。（要求与说明：细胞活力的具体检测方法不作要求。）
①；
②；
③分组（用表格形式表示）：；
④放在相同且适宜的条件下培养，。
⑤记录分析实验结果，得出实验结论。
①癌细胞的数量可在显微镜下用计数。研究发现使用药物Y后，溶酶体活性增强，推测药物Y可能会诱导癌细胞，从而使癌细胞数量减少。
②泛素—蛋白酶体系统（UPS）可以降解细胞内80%以上的蛋白，对细胞的生长、DNA修复发挥重要作用，肿瘤细胞UPS活性异常增高，由此推测，可通过机理研发治疗癌症的药物。
备选材料和用具：姜黄素（用2%乙醇配制）、大豆异黄酮（用2%乙醇配制）、2%乙醇、0.9%NaCl溶液、胰腺癌细胞悬液、动物细胞培养液 、卡氏瓶、CO2培养箱、血细胞计数板、显微镜、流式细胞仪等。
①取卡氏瓶若干个，均分为4组，编号为A、B、C、D，每组设置多个重复样本；
②向上述各组加入适量且等量的胰腺癌细胞悬液和动物细胞培养液；
③；
④在CO2培养箱中控制适宜条件培养一段时间后，用血细胞计数板测定各组总细胞数，用流式细胞仪测定凋亡的细胞数，计算胰腺癌细胞增殖率和凋亡率；
⑤。
①姜黄素和异黄酮合用时对胰腺癌细胞增殖的抑制作用明显好于单独使用，最可能的原因是；
②人体内癌细胞的凋亡是免疫的结果。
