“观察根尖分生组织细胞的有丝分裂”实验

1．实验原理
①在植物体的根尖、茎尖等部位的分生组织细胞有丝分裂旺盛。
②细胞核内的染色体(质)易被碱性染料(龙胆紫溶液)染成深色。
③由于各个细胞的分裂是独立进行的，在同一分生组织中可以通过高倍显微镜观察细胞内染色体的存在状态，判断处于不同分裂时期的细胞。
2.实验材料：
洋葱根尖。理由：根尖生长点属于分生组织，细胞分裂能力强，易观察到有丝分裂各个时期的细胞。
3．实验步骤

步骤	注意问题	分析
一、根尖的培养实验前3~4天，将洋葱放在广口瓶上，底部接触清水。根长1cm~5cm时可用	置于温暖处，常换水	因为细胞分裂和生长需要水分、适宜的温度和氧气。
二、装片的制作（解离→漂洗→染色→制片） 1、解离：上午10时至下午2时，剪取根尖2 ~3毫米，立即放入盛有质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精溶液的混合液（1：1）的培养皿中，室温下解离3~5min。 2、漂洗：待根尖酥软后，将根尖置于盛有清水的玻璃皿中约10分钟。 3、染色：把洋葱根尖放进盛有质量浓度为0.01g/mL或0.02g/mL1％龙胆紫溶液的玻璃皿中染色3~5分钟。 4、制片：用镊子将这段洋葱根尖取出来，放在载玻片上，加一滴清水，并用镊子尖把洋葱根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后用拇指轻轻地压载玻片，使细胞分散开。	解离时间要保证，细胞才能分散开。解离时间也不宜过长。漂洗要充分，可换水1~2次染色时间不宜过长，否则显微镜下一片紫色，无法观察。要弄碎根尖，再垂直向下均匀用力压片，不可移动盖玻片。	这一时段根尖分生区细胞处于分裂期的较多。解离的目的：溶解细胞间质，使组织中的细胞相互分离开来。此时细胞已被盐酸杀死。否则，根尖过于酥软，无法取出。目的：洗去解离液，防止解离过度。龙胆紫或醋酸洋红为碱性染料，可使染色体着色。目的：使细胞分散开来，有利于观察。做得成功的装片，标本呈云雾状。
三、观察 1、低倍镜观察：把装片放在低倍镜下，慢慢移动装片，找到分生区细胞。 2、高倍镜观察：移走低倍镜，换上高倍镜，用细准焦螺旋和反光镜把视野调整清晰，仔细观察，找出处于细胞分裂找出前期、后期、末期的细胞。	一定要找到分生区。在一个视野里，往往不容易找全有丝分裂过程中各个时期的细胞。如果是这样，可以慢慢地移动装片，从邻近的分生区细胞中寻找。	分生区细胞特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正处于分裂期。

1. (2019·金山模拟) 在制作洋葱根尖临时装片观察细胞有丝分裂时，用于染色的试剂以及被染色的物质依次是（ ）

1. (2019·金山模拟) 在制作洋葱根尖临时装片观察细胞有丝分裂时，用于染色的试剂以及被染色的物质依次是（）