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  • 1. (2018·静安模拟) 现代生物技术

    海洋石油污染正引起广泛关注,利用基因工程菌进行生物降解具有巨大的应用潜力。P450是石油降解的关键酶,用SalI和NdeⅠ联合酶切获得的P450基因,与甲图所示的质粒(pCom8)重组,导入土著菌种Y9,获得了基因工程菌P450/Y9。甲图中mel是黑色素合成基因,其表达能使白色的菌落变成黑色,aacCl是庆大霉素(一种抗生素)抗性基因,限制酶NdeⅠ、XhoⅠ和SspⅠ在原质粒上均只有一个酶切位点,数字表示酶切位点间的碱基对数。乙图表示几种限制酶的识别序列和切割位点。

    1. (1) 上述基因工程中的受体细胞是
    2. (2) 原质粒需用限制酶作用后,才能与在DNA连接酶的作用下形成重组质粒。

      经测定原质粒为7.6kb(1kb为1000个碱基对),重组质粒经NdeⅠ、SspⅠ联合酶切后获得了6.0和1.2kb的两个片段,则目的基因的长度为kb。

    3. (3) 由于重组质粒导入受体细胞的成功率很低,所以需要经过才能获得工程菌。操作的大致思路是:

      第一步,配制培养基。除下表中的成分外,还必须添加

      第二步,晶待检菌液用法接种在第一步配制的培养基上。

      第三步,选择色菌落扩大培养即可获得所需的工程菌。

      蛋白胨

      酵母浸膏

      NaCl

      KCl

      MgCl2

      H2O

      pH

      20.0 g

      5.0 g

      0.5 g

      0.2 g

      1.0 g

      1000 mL

      7.0

      为检测基因工程菌降解石油的能力,科研人员做了如下4组实验,测定不同时间各组的石油降解率,实验结果见图。

      A组:单独使用Y9

      B组:单独使用P450/Y9

      C组:联合使用Y9、W3、F9、X1四种菌种

      D组:联合使用P450/Y9、W3、F9、X1四种菌种

    4. (4) 据图分析以下说法正确的是________(多选)。
      A . 单独使用P450/Y9对石油的降解能力比单独使用Y9略强 B . 作用时间越长,P450/Y9对石油降解的能力越强 C . 联合使用时,P450/Y9能显著增加四种菌的整体降解石油的能力 D . 为达到更好的效果,最好单独使用基因工程菌P450/Y9

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