1. (2017高三上·桐城期末) 凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，研究人员利用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达．如图表示EcoRI，BamHI，PstI三种限制酶在质粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位点．回答下列问题：

1. （1） 根据图中EcoRI，BamHI，PstI三种限制酶的切割位点分析，该工程中最不适宜用来切割外源DNA获取目的基因的限制酶是 ， 原因是 ． 将切割后的质粒和目的基因连接起来需要酶．构建好的重组质粒在目的基因前要加上特殊的启动子，它是识别和结合的部位．
3. （2） 研究发现，如果将该凝乳酶第20位和第24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍．科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是 ． 该生物工程技术对蛋白质结构的设计和改造，必须通过基因来完成，原因是 ．