1. (2020高三下·安徽月考) [生物——选修3：现代生物科技专题]

VNN1基因(1542bp)与炎症相关性疾病有关，GFP基因(4735bp)控制绿色荧光蛋白的合成，该蛋白可在相应波长的紫外光激发下发出绿色荧光。某研究小组进行鼠源GFP－VNN1重组质粒的构建及其功能研究，回答下列问题：

1. （1） 为构建重组质粒，研究小组从数据库查找到VNN1的DNA序列，并设计引物。上游引物：5'－AAGCTTCCGCTGCACCATGACTACTC－3'(下划线为Hind III酶切位点)，下游引物：5'－GGATCCGCTCGAGCTACCAACTTAATGA－3'(下划线为BamH I酶切位点)，之后进行PCR扩增，PCR的原理是。扩增后的VNN1基因要与含GFP基因的载体连接，需用(填具体酶)切割VNN1基因和含GFP基因的载体，再用酶处理，构建重组质粒。
3. （2） GFP基因在重组质粒中可作为，其作用是。用之前相同的限制酶对GFP－VNN1重组质粒切割后，进行电泳鉴定时得到如图1所示的部分条带，结果表明。
5. （3） IL－6为体内重要的炎症因子，能与相应的受体结合，激活炎症反应。图2为GFP－VNN1重组质粒对细胞分泌IL－6的影响，由此说明；同时发现与正常组比较，空质粒转染组IL－6的表达有轻微升高，造成这种现象的可能原因是。