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  • 1. (2020·厦门模拟) 人体内的t-PA蛋白能高效降解由纤维蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和脑血栓的急救药。然而,为心梗患者注射大剂量的基因工程t-PA会诱发颅内出血,其原因在于t-PA与纤维蛋白结合的特异性不高。研究证实,将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸,能显著降低出血副作用。据此,先对天然的t-PA基因进行序列改造,然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因,可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。(注:下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒,新霉素为抗生素。)

    回答下列问题:

    1. (1) 已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板链碱基序列为ACA,而丝氨酸的密码子为UCU,因此改造后的基因决定第84位丝氨酸的模板链的碱基序列应设计为
    2. (2) 若t-PA改良基因的粘性末端如图所示,那么需选用限制酶切开质粒pCLY11,才能与t-PA改良基因高效连接,在连接时需要用到 酶。
    3. (3) 应选择(能/不能)在加入新霉素的培养基中生存并形成菌落的大肠杆菌作为受体细胞,目的是。在加入新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株,需选择呈色的菌落,进一步培养、检测和鉴定,以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。
    4. (4) 以上制造性能优异的改良t-PA蛋白的过程称为工程。

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