1. (2020·邵阳模拟) 正常细胞不能合成干扰素，但含有干扰素基因。我国科学家釆用基因工程技术生产干扰素a-2b已实现量产。具体做法是将产生干扰素的人白细胞的mRNA分离，反转录得到干扰素基因。将含有四环素、氨苄青霉素抗性基因的质粒PBR322和干扰素基因进行双酶切，用连接酶连接。将重组载体DNA分子在一定条件下导入大肠杆菌，在培养基中筛选培养，检测干扰素的表达量，选出高效表达的工程菌。请回答：

1. （1） 在分化诱导因子作用下，正常细胞可以摆脱抑制、合成干扰素，该过程发生的实质是
3. （2） 据下图分析，构建重组载体DNA分子时，可以选用两种限制酶对质粒pBR322和干扰素基因进行双酶切，目的是既能保证目的基因和质粒正向连接，又能防止(答两点)。

   

5. （3） 将重组质粒导入大肠杆菌中，然后将细菌涂布到含的选择培养基上培养，就可得到含质粒PBR322或重组质粒的细菌单菌落；再从每一个单菌落中挑取部分细菌转涂到含有的培养基上，不能生长的绝大部分是含有重组质粒的细菌，原因是
7. （4） 干扰素在体外保存非常困难，如果将其分子中的一个半胱氨酸变成丝氨酸，在-70℃ 条件下可以保存半年。实现这一转变需要直接对进行修饰或改造，这属于蛋白质工程的范畴。