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  • 1. (2020·南昌模拟) 人乳铁蛋白是乳汁中一种重要的非血红素铁结合糖蛋白。乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有广谱抗菌抗氧化、抗癌、调节免疫系统等强大生物功能。如图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的过程。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindⅢ、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。据图回答:

    1. (1) 若用PCR技术扩增人乳铁蛋白基因,其前提条件是有一段,以便合成相应的引物,合成的引物能与待扩增区段(中间/两端/左端/右端)的DNA序列彼此互补。
    2. (2) 图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含的培养基上进行。经过两种培养基培养后再从处(填字母),挑出大肠杆菌扩增带有外源DNA的重组载体。为使人乳铁蛋白基因在牛的乳腺细胞中特异性表达,应在基因的上游插入
    3. (3) 过程②的代孕牛需要进行处理。若需获得多头转基因牛可对早期胚胎进行分割,对囊胚进行分割时需要注意
    4. (4) 为检测转基因牛的乳汁中是否含有人乳铁蛋白,可采用技术。

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