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高中生物学
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综合题
1.
(2020·重庆模拟)
基因工程又称基因拼接技术和DNA重组技术,是以分子遗传学为理论基础,以分子生物学和微生物学的现代方法为手段。如图是基因工程示意图,请据图回答下列问题:
(1) 利用PCR技术对目的基因进行扩增时,需加入
酶。该技术依据的原理是
,在操作步骤中需要加热至90~95℃使
,然后降温至55~60℃,使
。
(2) 进行①过程时,需用
酶切开载体以插入目的基因。若要使目的基因在受体细胞中表达,需要导入基因表达载体,而不是直接导入目的基因,其原因是:
(答出两点即可)。
(3) 若图中宿主细胞为大肠杆菌,一般情况下②过程采用
处理大肠杆菌,使其成为感受态细胞 。
(4) 真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解,在实验中应选用
缺陷型的大肠杆菌作为受体细胞,并在蛋白质纯化的过程中应添加蛋白酶的抑制剂。
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