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  • 1. (2020·新疆模拟) 根据以下植物基因工程的操作步骤,回答有关问题。

    1. (1) 利用PCR技术从cDNA文库中获取目的基因(基因序列未知),需根据相应蛋白质的氨基酸序列设计多种引物,原因是,基因表达载体中目的基因上游的是RNA聚合酶的识别位点。
    2. (2) 将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是
    3. (3) 下图是利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入植物受体细胞的示意图。图中质粒含CRISPR基因和Cas9基因,CRISPR基因转录的sgRNA可以特异性识别细胞核DNA分子中的特定序列,Cas9基因表达的Cas9酶能切割被sgRNA识别的DNA序列。重组片段中的目的基因,能通过DNA损伤修复和被切割的DNA序列连接。

      sgRNA通过特异性识别细胞核DNA分子中的有关序列,sgRNA,Cas9酶和基因工程中的基本工具作用相似。不同基因工程中利用的CRISPR/Cas9质粒有差异,这些质粒中所含的CRISPR基因通常是(填“相同”或“不同”)的,所含的Cas9基因通常是(填“相同”或“不同”)的。

    4. (4) 利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将目的基因导入受体细胞与“(2)”中使用的方法相比,优点是

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