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  • 1. (2019高二下·朝阳期末) 牛支原体是严重危害牛养殖业的一种病原菌,它能引起肺炎、关节炎等多种疾病。VspX蛋白是牛支原体表面的一种脂蛋白,在牛支原体感染宿主细胞时起黏附作用。科研人员制备抗VspX单克隆抗体,并进行相关研究。

    1. (1) 将等量的纯化VspX蛋白作为分别注射到5只小鼠体内,经过二次免疫后测定小鼠抗VspX抗体的免疫效果,取其中免疫效果最好的1号小鼠用于后面的融合实验。
    2. (2) 在融合前三天,对1号小鼠加强免疫一次,目的是。然后取小鼠的脾脏细胞用试剂诱导与骨髓瘤细胞融合,用选择培养基进行筛选得到
    3. (3) 一段时间后,将(2)所得细胞接种到多孔培养板上,进行抗体阳性检测,检测原理如下图。

      ①在检测时需要将VspX蛋白固定于固相载体表面制成,并加入多孔板培养槽中的(细胞、上清液),即待测样本。

      ②加入酶标抗体后一段时间,需要用洗涤剂将未与结合的酶标抗体洗去。

      ③加入相应酶促反应底物显色后,颜色的深浅可代表

    4. (4) 将上述细胞经酶处理,制成细胞悬液,除添加一般营养物质外,还需加入,并置于中进行扩大培养,提取抗VspX单克隆抗体与不同抗原进行杂交检测,结果如下图

      实验结果表明抗VspX单克隆抗体不能与3、4结合,具有很强的,可用于后续关于牛支原体所引发相关疾病等方面的研究。

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