1. (2020·武威模拟) Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。其技术流程如图：

1. （1） 步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的。
3. （2） 步骤②中，重组胚胎培养到 期时，可从分离出ES细胞。
5. （3） 步骤③中，需要构建含有基因Rag₂的表达载体。可以利用扩增Rag₂基因片段。用Hind III和PstI限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag₂基因片段。为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有和的酶切位点。
7. （4） 为检测Rag₂基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的，用进行杂交实验。