1. (2017·天津)

玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性状，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤 I、II试验．

Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如图．

1. （1） 为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是    （单选）．

   ①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

   ②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

   ③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

   ④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

   A . ①③ B . ①④ C . ②③ D . ②④
3. （2） 如表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果．据表可知，细胞脱分化时使用的激素是，自交系的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体．

   激素 结果 自交系	2，4﹣D（2.0mg/L）	6﹣BA（0.5mg/L）	IBA（2.0mg/L）
   	愈伤组织形成率（%）	芽的分化率（%）	根的诱导率（%）
   甲	99	13	90
   乙	85	80	87
   丙	88	83	12
   丁	16	85	83

5. （3） 农杆菌转化愈伤组织时，T﹣DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞．筛选转化的愈伤组织，需使用含的选择培养基．

7. （4） 转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长．含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色．用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是          （多选）．

   A . 无农杆菌附着的未转化愈伤组织 B . 无农杆菌附着的转化愈伤组织 C . 农杆菌附着的未转化愈伤组织 D . 农杆菌附着的转化愈伤组织
9. （5） 组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占．继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A．

   II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

11. （6）

    抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F₁ ， 然后进行多轮回交（如图）．自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代．

    

13. （7）

    假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F₁、H₁、H₂、H₃各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图．若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图．

    

15. （8） 如表是鉴定含G基因植株的4种方法．请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是．

    方法	检测对象	检测目标	检出的含G基因植株的比例
    PCR扩增	基因组DNA	G基因	x1
    分子杂交	总mRNA	G基因转录产物	x2
    抗原﹣抗体杂交	总蛋白质	G基因编码的蛋白质	x3
    喷洒除草剂	幼苗	抗除草剂幼苗	x4

    对H_n继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系．