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  • 1. (2020高三上·深圳月考) 【现代生物科技专题】

    质粒通常用来构建基因表达载体,基因表达载体的构建是实施基因工程的核心。构建基因表达载体前首先要获取目的基因,PCR是获取大量目的基因的一种方法,如一个DNA片段上有10种基因,现只需要其中的某个基因,PCR技术就可以实现在生物体外复制特定DNA片段(目的基因)的目的。

    1. (1) PCR反应体系的成分中有两种引物,在复性时引物会结合到互补DNA链,对两种引物的设计要求之一是:两种引物之间不能碱基互补配对,试分析原因;PCR反应体系的成分中能够决定复制特定DNA片段的是(填模板”、“引物”或“taq酶”);从引物设计的角度考虑,如果目的基因两侧没有酶切位点,用PCR技术(“可以”或“不可以”)为目的基因设置酶切位点。
    2. (2) 构建基因表达载体的目的是(答出两点即可)。一个基因表达载体的组成,除了目的基因外,还必需有启动子和终止子,启动子的本质是 ,其为识别和结合的位点。
    3. (3) 图1表示质粒载体,图2表示插入了目的基因的重组质粒,被转化的大肠杆菌有两种,分别是含有质粒载体和含有插入目的基因的重组质粒,结合图示,这两种大肠杆菌可以用图中抗性基因进行筛选。

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