1. (2017·黄浦模拟)

回答下列有关基因表达和生物工程问题．

如图1所示为用PvuⅠ限制酶切下的某目的基因（4kb，lkb=1000个碱基对长度）及其上DNA片段示意图．

如图2所示为三种质粒示意图．图中AP为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因．EcoRⅠ（0.7Kb）、PvuⅠ（0.8Kb）等为限制酶及其切割的位点与复制原点的距离．复制原点是在基因组上复制起始的一段序列，是指质粒在受体细胞中复制时的起点．

1. （1） 基因工程是生物工程核心技术．下列是分子实验室中构建产生胰岛素基因工程菌的部分操作，正确流程是．（用题中编号排序）

   ①筛选含有胰岛素基因的受体细胞   ②胰岛素基因与运载体重组

   ③重组DNA导入受体细胞           ④获取胰岛素基因

3. （2） 片段D为目的基因中的某一片段，有关叙述正确的是　      　（多选）．

   A . 若图中的ACT能决定一个氨基酸，则ACT可称为一个密码子 B . DNA连接酶作用于②处，DNA解旋酶作用于①处 C . 若只用片段D中的3个碱基对，则可以排列出4³种片段 D . 同一脱氧氧核苷酸链中相邻的两个碱基之间依次经过“一脱氧核糖﹣磷酸基﹣脱氧核糖﹣”连接
5. （3） 图2中质粒A、质粒C能否作为目的基因运载体最理想的质粒？（能/否）．为什么，

   请说明理由．

7. （4） 用EcoRⅠ完全酶切目的基因和质粒B形成的重组质粒（EcoRⅠ在目的基因和质粒上的酶切位点如上两图所示），则进行电泳后观察可出现长度为1.1kb和kb，或者分别是kb和kb两个片段．（重组质粒上目的基因的插入位点与EcoRⅠ的识别位点之间的碱基对忽略不计）．