1. (2021高二下·宣城期中) 研究发现从锥形蜗牛体内提取出的毒液有望帮助人类开发出超级速效的胰岛素。研究表明锥形蜗牛毒蛋白（Con-Ins G1）能加速受体细胞信号转换，比人类胰岛素能更加快速地发挥作用。因此制造这类“速效胰岛素”以及利用转基因技术实现批量生产成为Ⅰ型糖尿病治疗的新思路。回答下列问题：

1. （1） 利用基因工程制造Con-Ins G1的过程中，构建的基因表达载体一般包括目的基因、、标记基因和复制原点，其中标记基因的作用是。基因工程中需要DNA连接酶，根据酶的来源不同分为两类，其中既可以“缝合”双链DNA片段互补的粘性末端，又可以“缝合”双链DNA片段的平末端。
3. （2） 为了获得目的基因，可以通过提取分析Con-Ins G1中的序列推知毒蛋白基因的。获得的目的基因可通过技术进行大量扩增。
5. （3） 将目的基因导入大肠杆菌体内，一般先用Ca²⁺处理大肠杆菌使之成为细胞。
7. （4） 经过目的基因的检测和表达获得的Con-Ins G1活性未能达到期待的“速效胰岛素”的生物活性，导致这种差异的原因可能是。