1. (2021高二下·浙江期中) 回答下列（1）、（2）小题：

1. （1） 平板浇注法是常用的菌种分离纯化方法，是将待分离的样品用无菌水作梯度系列稀释后，取合适稀释度的少量菌悬液加至无菌培养皿中，立即倒入融化的固体培养基，经充分混匀后，置室温下培养。如图是研究人员用平板浇注法从土壤样品中分离以工业废甲醇为碳源的酵母菌，并进行大量培养的操作流程，请回答下列问题：

   

   Ⅰ.为分离培养该酵母菌，配制培养基时应以为唯一碳源，按照培养基配方准确称量各组分，将其溶解、定容后，调节培养基的pH，及时对培养基进行分装，并进行灭菌。

   Ⅱ.取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中，步骤③中将温度约（填“25℃”“60℃”或“90℃”）的培养基倒入培养皿混匀，冷凝后倒置培养。经培养，可在培养基的部位出现单菌落。

   Ⅲ.用挑取平板中长出的单菌落，按步骤④所示进行划线分离。下列叙述不合理的是。

   A．为保证无菌操作，接种环使用前必须进行灼烧灭菌

   B．划线时应避免划破培养基表面，以免不能形成正常菌落

   C．挑取菌落时，应挑取多个菌落，分别测定酵母菌细胞中甲醇的含量

   D．可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度，获得甲醇高耐受株

   Ⅳ.步骤⑤中，为使酵母菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和供应。为监测酵母菌的细胞密度，将发酵液稀释1000倍后，用25×16（1mm×1mm×0.1mm）型血细胞计数板计数5个中格中的细胞个数之和应不少于，才能达到每毫升至少含2×10⁹个细胞的预期密度。

3. （2） 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘细胞分泌的一种糖蛋白，制备抗HCG的单克隆抗体可用于早孕的诊断。下图是抗HCG的单克隆抗体制备流程示意图。回答与动物的克隆有关的问题：

   

   Ⅰ.图中的抗原是。①过程中促进细胞融合的最常用化学药剂是。利用杂交细胞检测特定染色体丢失与特定基因产物减少的对应关系可以进行。

   Ⅱ.③过程需进行专一的，筛选出的X细胞具有的特点是。

   Ⅲ.④为通过细胞克隆对X细胞进行培养，得到连续，可以长久地生产单克隆抗体。同时还需要添加一定量的，以防止培养过程中的污染。下列不属于提高细胞克隆形成率的措施的是。

   A．添加胎牛血清B．添加胰蛋白酶

   C．使用CO₂培养箱D．添加滋养细胞