1. (2021高二下·江苏月考) 大肠杆菌β-半乳糖苷酶（Z酶）可催化白色底物（X-gal）水解产生蓝色物质。在pUC18质粒中，LacZ编码Z酶氢基端的一个片段（称为α-肽），该质粒结构及限制酶识别位点如图甲所示。已知α-肽、缺失α-肽的Z酶片段单独存在时均无z酶活性，共同存在时就会表现出Z酶活性。利用图乙中的 DNA 片段与pUC18质粒进行基因工程操作。

1. （1） 获得目的基因后，通过 PCR 技术扩增。PCR反应过程按顺序包括变性、，其中变性过程要将温度加热至，另外，PCR 反应中还需要用的到酶是 。
3. （2） 限制酶能催化双链 DNA 分子中的断裂。本实验可使用限制酶处理 pUC18 质粒和图乙中的 DNA 片段，再通过连接，获得含目的基因的重组质粒。
5. （3） 用重组质粒转化大肠杆菌，然后将大肠杆菌接种到含的固体培养基上进行培养，由于未发生转化的大肠杆菌没有该质粒，因而不能在该培养基上不能生长。
7. （4） 当上述培养基中含有X-gal时，生长出的菌落有蓝色和白色两种类型，其中含有重组质粒的大肠杆菌的菌落颜色为，这是因为。为了保证能通过菌落颜色辨别是否含有重组质粒，本实验作为受体细胞的大肠杆菌中Z酶基因应满足的条件是。