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  • 1. 某研究性学习小组利用荧光素﹣荧光素酶生物发光法,测定人参愈伤组织中ATP的含量,以研究人参细胞能量代谢的特点.

    实验原理:荧光素在荧光素酶、ATP等物质参与下,进行反应发出荧光;用分光光度计可测定发光强度;当荧光素和荧光素酶都足量时,在一定范围内,ATP的含量与发光强度成正比.

    实验步骤:

    一 ATP的提取:称取一定量的人参愈伤组织,研磨后沸水浴10min,冷却至室温,离心,取上清液.

    二 ATP的测定:吸取一定量的上清液,放入分光光度计反应室内,并注入适量的所需物质,在有氧等适宜条件下进行反应,记录发光强度并计算ATP含量.

    请回答下列问题.

    1. (1) 步骤一中的沸水浴处理,使酶的被破坏而失活.
    2. (2) 步骤二注入的物质中,属于反应物的是;分光光度计反应室内能量形式的转换是
    3. (3) 荧光素酶价格昂贵,为能准确测定出ATP的含量,又能节省酶的用量,学习小组探究了“测定ATP时所需荧光素酶溶液的最佳浓度”,实验结果如图:

      ①学习小组配制了1×10﹣8mol/LATP标准液、70mg/L荧光素溶液(过量)和溶液进行实验.

      ②结果表明:图中点所对应的荧光素酶浓度为最佳浓度.e、f、g点所对应的荧光素酶浓度不同,但发光强度相同,这是因为

    4. (4) ATP测定对食品卫生监控有重要意义.食品卫生检验人员利用上述生物发光法测定某熟食品样品中细菌的ATP总含量,测算出了细菌的数量,从而判断食品污染程度.做出上述判断的理由是:每个细菌细胞中ATP的含量

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