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高中生物学
/
1.
(2021高三上·广东开学考)
孔雀石绿(简称MG)是广泛使用的有机染料,在自然环境中极难降解,容易引起土壤污染,进而危害人体健康,因此从土壤中分离和筛选出高效的MG降解菌有非常重要的意义。已知MG在水中溶解度低,含过量MG的固体培养基不透明。
(1) 培养基的配制:MG降解菌富集培养基需含有NaH
2
PO
4
、KH
2
PO
4
、NaCl、NH
4
Cl、CaCl
2
、MgSO
4
、水等,再加
作为唯一碳源。培养基配制好后,需用
法进行无菌处理才能后续使用。
(2) MG高效降解菌株的富集:如图所示,将1.0g土样接入含上述配制好的培养液的三角瓶中,将三角瓶置于30℃、180r/min摇床中振荡培养1-2天,此操作的目的是
,直至培养液变浑浊后,换瓶重复操作2-3次,以达到富集的目的。
(3) MG高效降解菌株的分离和纯化:图中所示的分离纯化细菌的方法是
。实验中初步估测A中细菌细胞数为1.5×10
9
个/mL,若要在图中每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液,且每个平板上长出的菌落数约为150个,则应将A中的菌液稀释
倍。
(4) MG高效降解菌株的鉴定:将纯化获得的菌种接种于含过量MG的固体培养基(其他营养成分等适宜)上,根据培养基是否出现
,就可以鉴别出目的菌株,原因是
。
(5) MG高效降解菌株的保存:获得纯净的菌种后,需要进行菌种的保藏。若需要长期保存,可以采用
的方法。
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