1. (2021高三上·青岛开学考) 镰孢菌引起的小麦赤霉病被称为小麦“游症”，是威胁粮食安全的重大国际性难题。我国科学家从小麦近缘属植物长穗偃麦草中首次克隆出主效抗赤霉病基因Fhb7（编码一种谷胱甘肽S-转移酶），为解决小麦赤霉病的世界性难题提供了“金钥匙”。研究发现，用光诱导型启动子（PrbcS）能够使Fhb7基因表达，其结合T基因后能使Fhb7基因更高水平表达。

1. （1） PrbcS是一段有特殊结构的DNA片段，能被识别并结合，驱动基因的持续。
3. （2） 通过PCR技术扩增Fhb7基因片段，反应过程一般由95℃热变性、55～60℃引物和模板配对、72℃延伸三个步骤，经过多次循环完成。延伸阶段选用72℃综合考虑了两个因素，这两个因素是和，若研究人员在反应缓冲溶液中加入4种dNTP时，误加入了单一种类的ddNTP（即2、3双脱氧核苷三磷酸，在脱氧核糖的3位置缺少一个羧基），则子链会停止延伸，分析其原因是。
5. （3） 下图中甲、乙均为Fhb7基因表达载体构建过程中的中间载体，请分析重组载体的部分构建过程。

   

   （注：Km^r为卡那霉素抗性基因，origin为复制原点，其余为限制酶酶切位点）

   区别含有中间载体甲-PrbcS-*T与含有重组载体乙-PrbcS-*T的微生物的方法是。经酶切后凝胶电泳，测得2B片段为0.3kb，经图示信息分析，PrbcS-T的长度约为。据图分析，形成重组载体乙-PrbcS-*T，需要使用限制酶切割，图中重组载体乙-PrbcS-*T问号处有种限制酶的酶切位点。