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  • 1. (2021·恩施模拟) 刍草是玉米是原始祖先,具有较强的抗病抗逆特性,为玉米育种提供了原始的遗传材料。研究发现大刍草基因组中有一个D基因仅在体细胞(2n)和精子中正常表达,在卵细胞中不转录。为研究D基因表达对卵细胞的影响,设计了实验。据图回答:

    1. (1) D基因在大刍草卵细胞中不转录,从基因结构角度推测其可能的原因是卵细胞中
    2. (2) 要构建大刍草的CDNA文库,应从大刍草中提取总RNA,原因是。由总RNA在相关酶的作用下获得D基因编码蛋白的序列。按如图所示构建重组表达载体。
    3. (3) 在过程①、②转化筛选时,过程中T-DNA整合到受体细胞染色体DNA上。
    4. (4) 从转基因植株未成熟种子中分离出胚,观察到细胞内仅含一个染色体组,判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的,而一般情况下大刍草卵细胞在未受精时不进行发育,由此表明
    5. (5) 在大刍草基因组中发现另一个B基因与其育性相关,为进一步研究B基因的功能,研究者将一段T-DNA插入到B基因中,致使该基因失活,失活后的基因记为b,现以野生植株和突变植株作为亲本进行杂交实验,统计母本植株的结实率,结果如表所示:

      杂交编号

      亲本组合

      结实率

      a

      ♀BB×♂bb

      0.1

      b

      ♀bb×♂BB

      0.5

      c

      ♀BB×♂BB

      0.5

      ①表中数据表明B基因失活后使配子育性降低。

      ②让杂交a的F1给杂交b的F1授粉,得到F2。为验证F2植株的基因型,研究者据B基因、T-DNA的序列设计了3种引物,如图所示:

      随机选取F2植株若干,提取各植株的总DNA,分别用“引物I+Ⅲ”组合及“Ⅱ+Ⅲ”组合进行PCR,检测是否能扩增(完整的T-DNA过大,不能完成PCR扩增)

      如果引物“I+Ⅲ”组及“Ⅱ+Ⅲ”组进行PCR均可完成扩增,则相应植株的基因型为

      如果,则相应植株的基因型为BB。

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