1. (2021高三上·浙江月考) 回答与高山兀鹫肠道微生物的分离鉴定与耐药性分析有关的问题：

1. （1） 细菌的分离与纯化。在无菌条件下，将高山兀鹫粪便样本，放入1 mL无菌水中，3000r /min离心5 min。取100μL，在无菌水中进行10倍梯度稀释，制成10^－1至10^－9梯度稀释液。分别吸取其中的不同梯度稀释液接种在LB琼脂和MRS琼脂培养基（乳酸细菌培养基）上。分别在有氧以及培养环境中，37℃培养24-48 h。然后挑取表征（颜色、大小、形状）不同的于LB肉汤和MRS肉汤中，分别在相应培养环境中37℃培养12 h。
3. （2） 药敏试验。采用药敏纸片琼脂扩散法，将特定的菌液均匀接种在琼脂培养基上，贴上34种药敏纸片。将贴有药敏纸片的培养基，放入培养箱中37℃培养16 h后测量直径，并依据抗菌药物敏感性试验的技术要求判定结果。以大肠埃希氏菌为质控菌株，若质控菌株的正常，则药敏试验的结果可靠。
5. （3） 当细菌长期处于含抗生素的生存环境时，在作用下，敏感菌株被抑制或杀灭，而天然耐药或获得性耐药菌株则继续生存、繁殖和克隆传播，进一步导致细菌的耐药性。