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高中生物学
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综合题
1.
(2017高三下·苏州模拟)
如图表示构建均由35S启动子驱动的CMO基因与BADH基因的植物双基因表达载体,图中标注了相关限制酶的酶切位点,35S表示启动子及其方向.Nos表示终止子,hpt表示潮霉素抗性基因.请据图分析回答:
(1) 从功能上分析,35S是
识别和结合的部位,Nos的功能主要是
.
(2) 过程①应利用
两种限制酶切割,酶切后回收载体A的大片段和CMO基因片段,加入含有
酶的缓冲液,获得载体C.进而在过程②中,利用
两种限制酶切割载体C和载体D,获得载体E.
(3) 利用冻融法将载体E导入农杆菌中,制备成菌液LB.将无菌烟草叶片切成0.4cm
2
大小,加入到菌液LB中浸泡10min,以便
.用无菌滤纸吸干叶片表面菌液,注入MS培养基,暗培养3d后转入到含有
的培养基中,筛选培养出含载体E的烟草若干株.
(4) 利用DNA分子杂交技术检测发现呈阳性的烟草植株,再进一步利用抗原﹣抗体杂交方法检测到
均有表达的烟草植株.
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