1. (2022高二下·淮南月考) 科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草．下图是转基因抗盐烟草的培育过程，含目的基因的DNA和质粒上的箭头表示相关的酶切位点．请分析回答下列问题：

1. （1） 在该过程中，研究人员首先获取了抗盐基因（目的基因），并采用PCR技术对目的基因进行扩增，该技术需要的条件是引物、酶、原料、模板，该技术必须用Taq酶；然后构建基因表达载体，基因表达载体中除了具有目的基因、启动子和终止子之外，还需具有 。目前在PCR反应中使用Taq酶而不使用大肠杆菌DNA聚合酶的主要原因是。
3. （2） 用图中的质粒和目的基因构建重组质粒，不能使用SmaⅠ酶切割，原因是 ，图中①②过程为防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，应选用酶对外源DNA，质粒进行切割。
5. （3） 为确定转基因抗盐烟草是否培育成功，既要用放射性同位素标记的作探针进行分子杂交检测，又要在个体水平上鉴定，后者具体过程是