1. (2022高三下·辽宁月考) 定点突变技术是指通过PCR等方法改变DNA片段特定位点的碱基，从而获得突变基因的操作技术。研究者将酿酒酵母S288c的APA1基因与EGFP（增强型绿色荧光蛋白）基因构成融合基因，并进一步构建表达载体，以该载体为模板，再通过PCR介导的定点突变技术向APAl基因中分别引人APA1-1/2/3/4四个突变位点，分别转化酿酒酵母YS59．回答下列问题：

1. （1） 构建APA1基因与EGFP基因的融合基因时，需借助的工具酶是，使APA1基因与EGFP基因首尾相连，处在同一、等调控序列的控制之下；EGFP基因的作用是。
3. （2） 上述PCR介导的定点诱变过程中，除以载体为模板外，还需要加入四种，两种根据的序列设计合成且含有突变位点的互补的引物。
5. （3） 若在荧光显微镜下观察到受体细胞有绿色荧光，表明。
7. （4） 若将定点突变的基因导人植物细胞，在一定（答出2点）等条件下，转基因细胞经过脱分化形成，进一步诱导其，可以发育成转基因植株。