1. (2022·成都模拟) 将微生物接种在只缺少某种营养物质的基础培养基中，再将所缺的营养物质点植于平板上，该营养物质便逐渐扩散于植点周围。该微生物若需要此种营养物质，便在这种营养物质扩散处生长繁殖，形成肉眼可见的菌落圈，这种测定微生物营养需求的方法称为生长谱法。某兴趣小组尝试用生长谱法测定某种大肠杆菌对糖类（碳源）的需求情况，操作流程如下：

Ⅰ．培养基的制备。该小组所用无碳培养基配方如表（加水定容至1L）：

成分	NaCl	KH2PO4	K2HPO4	（HN4）2SO4	MgSO4•7H2O	琼脂
质量/g	1	0.5	0.5	2	0.2	20

同时配制质量分数为10%的葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、乳糖溶液各50mL

Ⅱ．将大肠杆菌悬液与溶化并冷却至50℃的固体培养基混匀，倒平板。

Ⅲ．将已凝固的平板背面用记号笔划分为四个区，并注明要点植的糖类名称。

V．通过无菌操作分别加入蘸有不同糖类的无菌滤纸片，待平板吸收干燥后倒置培养24小时。

结合所学知识，回答下列问题：

1. （1） 无碳培养基配方中加入（NH₄）₂SO₄的目的是。对培养基及糖溶液通常采用的灭菌方法是。倒平板后用法进行接种。
3. （2） 该小组发现最终在培养基的四个区内均有菌落圈产生，但大小不同，据此得到的初步结论是。
5. （3） 生长谱法还可用于某些营养缺陷型菌株（失去合成某种生长因子能力的菌株）的筛选和鉴定，例如大肠杆菌经紫外线诱变处理后会产生一些营养缺陷型突变个体，现已纯化并制备出某营养缺陷型的菌悬液，但不清楚是氨基酸缺陷型、维生素缺陷型还是氨基酸-维生素缺陷型，某生物兴趣小组用生长谱法设计实验进行鉴定，请将他们的实验设计补充完整。

   实验思路：将菌悬液与溶化并冷却至50℃的不含氨基酸和维生素的基础培养基混匀，倒平板；将培养基划分成两个相等的区域A、B；A区、B区；在适宜温度下培养，观察菌落产生的区域。

   实验结果及结论：。