1. (2022高二下·南京期中) 为培育转固氮基因的小麦新品种，科研人员利用土壤农杆菌的Ti质粒和普通质粒按下图构建了双元载体系统（Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒），图中vir基因编码产物能激活T-DNA转移，ori为复制原点，tmr和tms为致瘤基因，LB和RB为T-DNA两端的重复序列，kan为卡那霉素抗性基因，ter 为四环素抗性基因。下表是几种限制酶识别序列及切割位点。请回答下列问题：

限制酶	EcoR I	BamH I	Sau3A I	BclI	SmaI	Xmal
识别序列及切糖粒点	- G↓AATTC-	- G↓GATOC-	-↓GATC-	-T↓GATCA-	- CCC↓GGG-	-C↓CCGGG-

1. （1） 研究发现T-DNA的RB序列相当保守，是由于该序列的突变类型在过程中被淘汰。
3. （2） 双子叶植物受到损伤时，伤口处的细胞分泌大量酚类化合物会吸引农杆菌移向这些细胞。农杆菌一般难以感染小麦等单子叶植物，若想提高农杆菌转化小麦的成功率，可采取的方法是。·T-DNA转移至植物细胞可使植物患“肿瘤”，研究发现“肿瘤”的发生与植物激素有关，据此推测T-DNA中致瘤基因tmr、tms 可能与等植物激素的合成有关。
5. （3） 为防止植物形成“肿瘤”，研究人员按上图构建了双元载体系统。图中过程①需先用制酶处理Ti质粒以去除致瘤基因，再用酶将经过处理的固氮基因接入Ti质粒，以构建重组质粒；过程②用限制酶处理重组质粒，获得含vir基因的DNA片段和含固氮基因的T-DNA，再经过程③、④分别构建Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒。
7. （4） 科研人员用限制酶EcoRI和SauBAI处理T-DNA给体质粒，完全酶切后可以得到含条带的凝胶电泳图谱。
9. （5） 将构建的Ti辅助质粒和T-DNA给体质粒通过方法同时导入土壤农杆菌内，选择在含有的培养基上能形成菌落的土壤农杆菌去感染小麦细胞。该过程中T-DNA给体质粒并不含有vir基因，但仍能将转化成功的原因是。
11. （6） 种植转基因固氮小麦，在环境保护上的重要意义有。