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高中生物学
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1.
(2022·广州模拟)
肿瘤已成为严重危害人类健康的高发病,主要的治疗手段有化疗、放疗和手术等,而肿瘤细胞对肿瘤药物产生耐药性是化疗失败的主要原因之一,研究表明肿瘤细胞耐药性的产生与过量表达的跨膜转运蛋白BCRP有关,研究人员尝试建立稳定表达BCRP的细胞系。回答下列问题:
(1) 研究人员从人的
(填“普通体细胞”或“癌细胞”)中提取出总RNA,逆转录后进行PCR扩增获得大量BCRP基因。
(2) 随后构建BCRP基因的真核表达载体,研究人员选择了P质粒作为载体,因为其具有:①能被真核细胞识别的启动子,作用是
;②抗新霉素的标记基因;③多个限制酶切割位点,作用是
。
(3) 在不破坏表达载体各功能序列的基础上,对上述环状载体进行酶切得到线性化载体,随后将其导入到受体细胞中,线性化载体可整合到染色体DNA上。联系所学知识推测进行酶切得到线性化载体的原因是
。
(4) 通过筛选获得抗新霉素的受体细胞,并对其进行多层次检测,最终获得能高效表达BCRP的细胞,在培养液中培养一段时间后分瓶进行
(填“原代”或“传代”)培养,最终获得稳定细胞系,推测此细胞系在后续研究中的用途有
(写出1点)。
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