移动P3实验室里如何进行核酸检测
①移动P3实验室究竟长啥样?工作人员在里面是如何操作的?很多人都充满了好奇。那就让我们走进中国疾控中心移动P3实验室,近距离接触、感受,从而揭开它神秘的面纱。
②P3实验室是整个实验室完全密封,室内处于负压状态,从而使内部气体不会泄漏到外面造成污染的生物安全防护三级实验室的简称。通常用“三流”来概括它,即人流、物流、气流单向流动,确保里面的污染物不会泄漏到外面造成污染。
③移动P3实验室从外表看是白色的,个头很大,外形就如同集装箱。车长12.67米,宽2.5米,面积大约有30平方米,就像一个小一居,分为缓冲区和核心操作区。车内配备了实验过程需要的各类先进仪器,如生物安全柜、核酸提取仪、封膜仪、小型离心机等。工作人员操作的空间非常小,12平方米,一次可供4人操作。它最大的优势是可以移动,机动、灵活性强,哪里需要就可以开到哪里。
④缓冲区分为两道。第一道缓冲区在一进车门的右侧,大约一平方米左右。在这里,工作人员要更换实验用内胆服和白大衣,更换实验用鞋,佩戴医用防护帽子和N95口罩,然后,进入负压的移动实验检测车缓冲间(第二道缓冲区),穿上生物安全Ⅲ级实验用连体防护服,佩戴双层手套、防护鞋套、一次性隔离衣、护目镜或防护面屏,互相检查无误后进入移动实验室核心区进行实验。这个过程大约需要20—30分钟,也就是说,做一次实验,她们进出更换实验衣物及防护用品就需要大约一个小时。
⑤核酸检测工作有哪些步骤呢?首先,样本接收工作人员将送至检测车的样本登记、检查后,将感染性样本转运箱送至传递窗。值得一提的是,传递窗的门是互锁装置,它有不能同时打开的双重门,保证传递样本时带进去的空气被隔离在双重门中,使实验室外的环境不受污染。
⑥然后,核心区工作人员将样本转运箱表面消毒后在核心操作区开箱,取出生物安全运输罐。将生物安全运输罐表面消毒后置于生物安全柜,在生物安全柜内把罐打开,表面消毒后将样本采样管取出,按照实验样本编号排序。取适量样本加入病毒核酸提取试剂盒中,利用核酸提取仪提取样本核酸。开盖加样是操作的关键,因为戴着双重手套,所以显得有些笨拙,再加上护目镜或防护面屏和生物安全柜玻璃窗的两重阻隔,所有动作都显得缓慢,手也会不时颤抖,需要格外小心翼翼。
⑦接下来,按照双重实时荧光PCR检测试剂盒说明书,按检测样本数量配制PCR反应体系,将提取的核酸加入,利用实时荧光PCR仪进行检测,根据仪器输出的CT值,判断样本是阴性、阳性还是疑似。这个步骤就是通常所说的扩增反应,由于设备较多,P3实验室空间有限,所以工作人员就在旁边的P2实验室进行。
⑧工作人员一次能同时操作32人份,样本量大时需要进行多轮,加上提取核酸及手工清点样本时间,一般检测下来需要8个小时。如果有的样本扩增曲线显示不正常,需要复核,那时间就更长了。
⑨最后,检测完成的样本,经复核无误后,经紫外线照射消毒及消毒剂表面消毒后运出移动检测实验室,做高压灭菌处理。移动实验室样本接收人员负责最后实验室整理和清场,必要时进行终末消毒处理。
工作人员一次能同时操作32人份,样本量大时需要进行多轮,加上提取核酸及手工清点样本时间,一般检测下来需要8个小时。