1. (2022·天河模拟) 一种天然蛋白t-PA能高效降解因血浆纤维蛋白凝聚而成的血栓，是心梗和脑血栓的急救药，但是心梗患者注射大剂量的t-PA会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA蛋白第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低其诱发出血的副作用。据此，先对天然t-PA基因的碱基序列进行改造，然后再采取传统的基因工程方法表达该改造后的基因，可制造出性能优异的改良t-PA蛋白。（注：下图表示相关的目的基因、载体及限制酶。pCLY11为质粒）请回答下列问题：

1. （1） 利用以上技术制造出性能优异的改良t-PA蛋白的过程被称为工程。
3. （2） DNA重组技术中所选用的质粒载体应具有以下特征：质粒DNA分子上有复制原点，可以保证质粒在受体细胞中能；质粒DNA分子上有，便于外源DNA插入；质粒DNA分子上有，便于筛选出含质粒载体的宿主细胞。
5. （3） 拟改造t-PA基因，须先获取t-PA基因。若从cDNA文库中获取上t-PA基因，则从CDNA文库中获取的t-PA基因（填“含有”或“不含”）内含子序列。已知t-PA基因比较小，且碱基序列已经测出，也可以通过方法获取t-PA基因。已知t-PA第84位的半胱氨酸对应的模板链碱基序列为ACA，丝氨酸的密码子为UCU。则改造后的t-PA基因第84位的丝氨酸对应的模板链碱基序列应设计为。
7. （4） 若改造后的t-PA基因的粘性末端如上图所示，则需要选用限制酶和切割质粒pCLY11，才能保证质粒与t-PA改良基因高效连接。改良基因与质粒pCLY11构建基因表达载体时，需要酶催化，该酶催化形成键。
9. （5） 以大肠杆菌作为受体细胞，在含新霉素的培养基中形成菌落的受体细胞并非都是目的菌株，原因是。这时需选择呈色的菌落，进一步培养检测和鉴定，以选育出能生产改良t-PA蛋白的工程菌株。