1. (2021高二下·广东期末) 蓝舌病是由蓝舌病病毒（BTV）引起的感染牛、羊等家畜的烈性传染病。BTV病毒的核酸由双链RNA构成，可编码7种结构蛋白和5种非结构蛋白（只在被感染的细胞中表达）。研究人员将编码病毒的这些蛋白基因导入图1所示PUC18质粒中，用于制备相关疫苗的研究。请据图和所学知识回答问题：

注：图1为PUC18质粒（2.7kb），图2为质粒B（2.7kb），EcoRⅠ（0.6kb）、PvuⅠ（0.8kb）为限制酶及其切割位点与复制原点之间的距离。已知1kb=1000个碱基对。

1. （1） PUC18质粒为环状DNA分子，为了能成功构建重组DNA分子，需要先通过的方法获得目的基因，再用技术扩增。在建立基因文库的过程中须将含有目的基因的质粒导入中储存。
3. （2） 基因工程的核心步骤是。将图1的目的基因和图2所示质粒连接后，得到图3中三种方式。为选出正向连接的重组质粒，使用限制酶对重组质粒完全酶切后进行电泳分析，若是正向连接载体，结果会出现长度为Kb和Kb两种DNA分子。
5. （3） 重组病毒载体疫苗是以减毒病毒为载体，将抗原蛋白基因导入动物细胞并表达，进而引发免疫反应。研究人员在制备BTV重组病毒载体疫苗时不选用编码（结构蛋白/非结构蛋白）的基因作抗原基因，理由是。