1. (2022高二下·浙江月考)

1. （1） （一）研究人员欲从土壤中筛选高淀粉酶活性的目标菌研究。回答下列问题：
   为筛选胞外淀粉酶分泌型菌种，一般从（A．果园树下   B．肉类加工厂周围   C．米酒厂周围   D．枯树周围）获得土样，用无菌水稀释，接种至以为唯一碳源的固体培养基上进行培养，另外，该培养基还应含有氮源、水、无机盐、生长因子和。
3. （2） 微生物菌种纯化时，为得到单菌落，最常用的两种接种方法是和。从土壤中筛选目标菌时，加碘液染色后，平板上出现了A、B两种菌落（如下图所示）。如果要得到淀粉酶活力较高的菌株，应该选择（填“A”或“B”）菌落进一步纯化。

   

5. （3） 如果上图所示的平板培养基上除了上述A、B菌落外，还明显存在着另外一个菌落，但菌落周围并没有出现透明圈，据上述培养条件推测形成该菌落的微生物应属于生物。
7. （4） （二）枯草芽孢杆菌可分泌纤维素酶。研究者筛选到一株降解纤维素能力较强的枯草芽孢杆菌菌株（B菌），从中克隆得到了一种纤维素酶（C₁酶）基因。将获得的C₁酶基因与高效表达载体（HT质粒）连接，再导入B菌，以期获得降解纤维素能力更强的工程菌。
   对克隆到的C₁酶基因测序，与数据库中的C₁酶基因编码序列相比有两个碱基对不同，但两者编码出的蛋白的氨基酸序列相同，这是因为。
9. （5） C₁酶基因以B链为转录模板链，转录时mRNA自身的延伸方向为。为了使C₁酶基因按照正确的方向与己被酶切的HT质粒连接，克隆C₁酶基因时在其两端添加了SmaⅠ和BamHⅠ的酶切位点。该基因内部没有这两种酶切位点。图1中酶切位点1和2所对应的酶分别是。酶切后的C₁酶基因需要在酶的作用下与HT质粒连接构建基因表达载体。一个基因表达载体的组成必须有启动子、终止子、复制原点、、等。

   

11. （6） 转化形成工程菌的过程中，应先用处理枯草芽孢杆菌，使其处于容易吸收周围DNA的状态。
13. （7） 将纤维素含量为20%的培养基分为三组，一组接种工程菌，对照组1不进行处理，对照组2进行相应处理。在相同条件下培养96小时，检测培养基中纤维素的含量。图2结果说明工程菌降解纤维素的能力最强，推测对照组2的处理应为。
15. （8） 预期该工程菌在处理废弃物以保护环境方面可能的应用。（举一例）