1. (2022高二下·郑州期末) 图甲表示人们利用基因工程技术生产大胰岛素的操作过程示意图，实现基因工程操作通常使用到限制酶。图乙和图丙分别表示Sma Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切作用示意图，回答下列相关问题。

1. （1） 图甲中A表示，是通过②逆转录过程获得的，③④过程利用技术获得大量的A。
3. （2） 图甲中C→D过程，通常采用法将含有的质粒导入大肠杆菌细胞内，在其细胞内表达人胰岛素。
5. （3） 图乙中DNA分子经Sma Ⅰ限制酶切割后产生的DNA片段是末端，若将切下来的DNA片段重新拼接起来，可选用（填“E·coli DNA连接酶”或“T₄DNA连接酶”）。已知Mun Ⅰ识别序列和切割位点是—C^↓AATTG—，该酶切割DNA后所得末端与图丙所得末端（填“能”或“不能”）用E·coli DNA连接酶连接起来。若能连接，得到的DNA分子不能再次被EcoR Ⅰ或Mun Ⅰ重新切割的原因是。