1. (2022高二下·十堰期末) 新冠病毒（RNA病毒）引起的疫情仍在一些国家和地区肆虐，科研工作者研制的新冠病毒核酸检测试剂盒（RT-PCR荧光探针法）为新冠肺炎疫情防控提供了快速、简便、精准的核酸检测方案，RT-PCR荧光探针法即实时荧光定量PCR技术，通过荧光标记的特异性探针，对PCR产物进行标记跟踪，对待测样品通过检测荧光信号的累积（以Ct值表示）来确定样本中是否有病毒核酸。新冠病毒检测的具体操作过程如图所示，回答下列问题：

1. （1） 若要得到正确的检测结果，正确的操作步骤是（用数字序号表示），

   ①从病人组织样本中提取RNA；②利用PCR扩增DNA片段；③分析PCR扩增结果；④采集病人组织样本；⑤反转录获得cDNA。

3. （2） PCR反应中的每次循环可分为变性、复性和三步，其中变性的温度是，复性的目的是；PCR反应过程中子链的延伸方向是。
5. （3） 采集新冠肺炎疑似患者的咽部细胞样本提取核酸进行上述RT-PCR过程，每一个扩增出来的DNA序列，都可与预先加入的一段荧光标记探针结合，产生荧光信号，扩增出来的目的基因越多，观察到的Ct值就越。
7. （4） 新冠病毒疫苗有多种，其中我国科学家已研发出的腺病毒载体重组新冠病毒疫苗（重组疫苗）是一种基因工程疫苗，其基本制备步骤是：将新冠病毒的S基因连接到位于载体上的腺病毒基因组DNA中，重组载体经扩增后转入特定动物细胞，进而获得重组腺病毒并制成疫苗。重组疫苗只需要注射一针即可完成接种。数周后，接种者体内仍然能检测到重组腺病毒DNA，但其DNA不会整合到人的基因组中。请由此推测只需要注射一针即可起到免疫保护作用的原因：。