1. (2022高二下·常州期末) 图1为培育转AFPs基因（抗冻基因）番茄的示意图，外源DNA和质粒上均标出了酶切位点及相关抗性基因，其中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因。请分析并回答下列问题：

1. （1） 据图分析，若需使用插入灭活法筛选并鉴定重组质粒，应优先选用限制酶对目的基因和质粒切割。在形成的重组质粒上，能被RNA聚合酶识别且结合的部位称为。
3. （2） 图2中的A链和B链来自于AFPs基因。欲利用PCR技术对AFPs基因扩增4次循环，应选取的引物是，需要的引物数量是个。在这个过程中，还需要添加酶。

   

5. （3） 为提高导入成功率，常利用处理农杆菌，Ti质粒含有的可将目的基因整合到番茄细胞的染色体DNA上，采用技术将番茄细胞培育成转基因番茄。若要获得抗冻能力更强的抗冻番茄，可以对AFPs基因进行改造，最终得到相应的蛋白质，该过程需用到工程。检测转基因番茄是否产生抗冻蛋白，所用的方法是。
7. （4） 用插入灭活法筛选出的含重组质粒的农杆菌在含氨苄青霉素培养基和含四环素培养基上的存活情况分别是。