1. (2022高二下·盐城期末) 为探究某病菌对棉花的侵染路径，研究人员利用绿色荧光蛋白基因（sGFP）转化该种病菌，培育出表达绿色荧光蛋白的转基因菌株，并让其感染棉花植株，主要过程如下图。其中a链和b链分别是相应基因转录的模板链。相关限制酶识别序列和切割位点为：Hid Ⅲ——5 'G↓GATCC3'；BamH Ⅰ——5'A↓AGCTT3'。请回答下列问题：

1. （1） 过程②操作时，除图中标注物质外，还需要用向微量离心管中加入、、和水。至少需经过次扩增可获得8条长度为0.7Kb的脱氧核苷酸链。为保证sGFP正确插入到质粒中，还需要在引物1的5'端添加限制酶的识别序列，图中b链的黏性末端碱基序列（5'→3'）为。
3. （2） 过程③需要的工具酶是。经过过程①③可获得长度为Kb和4.2Kb的两种重组环状DNA．过程⑤中通过淘汰只导入不符合要求的重组环状DNA的受体菌。
5. （3） 过程④常采用的方法是。