1. (2022高二下·九江期末) 研究发现，养殖池底泥等富含亚硝酸盐。因此，可以从养殖池底泥中分离、纯化硝化细菌，并对其进行计数。回答下列问题：

1. （1） 制备培养基的步骤：计算→称量→溶化→调pH→灭菌→倒平板。若在“灭菌”步骤后“调pH”，则需注意的事项有（答出1点即可）等。
3. （2） 从池塘底泥中分离、筛选硝化细菌时，其培养基中的氮源是。不能直接以牛肉膏蛋白胨培养基作为筛选硝化细菌的培养基，原因是。
5. （3） 采用平板划线法接种时，所用接种工具与稀释涂布平板法所用接种工具灭菌的处理方法（填“相同”或“不同”）；在第一区域的基础上进行第二区域的划线操作要求是。若将1g池塘底泥悬浮液稀释10⁴后，各取0.1mL稀释液分别均匀涂布在3个选择培养基表面，测得菌落数的平均值为个，空白对照组平板上未出现菌落，则每克土壤中有硝化细菌5.4×10⁶个。
7. （4） 分离、纯化出能高效转化亚硝酸盐的硝化细菌后，若需对菌种进行长期保存，则常用的方法是。将硝化细菌接种到试管的固体斜面培养基上进行临时保存的缺点是。