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  • 1. (2022高二下·安康期末) 生物柴油作为新型能源已经成为世界上应用最广泛、发展迅猛的可再生能源之一。研究人员利用基因工程的方法,将油料作物紫苏的产油基因DGAT1与含有氨苄青霉素抗性基因的pMD克隆质粒构建pMD—DGAT1重组质粒,然后导入大肠杆菌扩大培养;再提取出扩增的pMD—DGAT1克隆质粒,与pBI121空载体同时用XbaI、BamH I两种酶酶切,构建pBI121—DGAT1表达载体:最后将表达载体导入四尾栅藻获得产油微藻,利用地热废水培养产油微藻不仅能生产生物柴油,还能治理地热废水。

    1. (1) 提取紫苏组织细胞RNA经过得到cDNA,再利用PCR技术扩增得到DGAT1基因。在PCR扩增之前,需要对DGAT1基因进行一次预变性的目的是;在扩增DGAT1基因时,需要根据设计特异性引物序列。
    2. (2) 在配制培养大肠杆菌的培养基时,要在培养基灭菌并冷却到30℃左右后,加入用无菌水配制的适宜浓度的氨苄青霉素溶液,氨苄青霉素不能与培养基一同灭菌的原因可能是
    3. (3) 将DGAT1基因插入到pBI121空载体的启动子与终止子之间的目的是。若用DGAT1基因探针检测产油微藻,能检测到细胞中的;判断产油微藻细胞中DGAT1基因是否成功表达,需要加入进行检测。
    4. (4) 为检测产油微藻对地热废水的去污能力,研究人员设计实验并得到相应实验结果如下表。

      指标

      总氮(mg/L)

      总磷(mg/L)

      氟化物(mg/L)

      废水培养基

      23.2

      4.32

      4.56

      培养转基因产油微藻11天后

      1.9

      0.45

      0.84

      该实验不能说明产油微藻显著提高了去污能力。请进一步完善实验设计:

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