1. (2022高三上·丰城) 植物细胞壁中存在大量不能被猪消化的多聚糖类物质，如半纤维素多聚糖、果胶质（富含有半乳糖醛酸的多聚糖）等，研究人员通过基因工程、胚胎工程等技术培育出转多聚糖酶基因（manA）猪，主要流程如下图（neo为新霉素抗性基因）。请回答下列问题：

1. （1） 利用PCR技术扩增manA时，需经过等阶段。设计PCR过程所需引物的主要依据是。复性时温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但碱基对含量多的引物需要设定更高的复性温度。
3. （2） 通过①过程获得的重组质粒含有4.9kb（千碱基对），其中manA基因含有1.8kb。现将该重组质粒成功导入受体细胞后，却只有50%左右的细胞能正常表达目的基因产物，原因是。

   若用BamHⅠ和EcoRⅠ联合酶切割其中一种重组质粒，只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段，若用上述联合酶切割同等长度的另一种重组质粒，则可获得kb长度两种的DNA片段。

5. （3） 在进行④过程时，通常需要定期更换培养液，目的是。
7. （4） ⑤过程中要对受体母猪进行处理，与普通猪相比，该转基因猪的优势是。