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  • 1. (2023·浙江月考) 使用胰岛素能有预防肾脏移植后糖尿病的发生,但同时也会降低患者的免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性。为验证胰岛素会降低免疫细胞对免疫抑制剂的敏感性,根据提供的实验材料,完善实验思路,预测实验结里,并进行分析与讨论。

    实验材料:PBMC细胞悬液(人外周血单个核细胞,主要是淋巴细胞和单核细胞)、细胞培养液、一系列不同浓度的环孢素、胰岛素、S961、锥形瓶等。

    (要求与说明:免疫抑制剂的作用程度可用半致死量IC50表示、即在规定时间内一半免疫细胞死亡时使用的免疫抑制剂浓度,环孢素是一种免疫抑制剂,S961是一种胰岛素受体拮抗剂;实验中涉及的剂量不作具体要求:实验条件适宜)

    1. (1) 完善实验思路:

      ①取锥形瓶若干,随即均分成4组,编号为A、B、C、D,分别加入等量适量PBMC细胞悬液和细胞培养液,用MTT法检测各组活细胞数量并记录。

      A组:加入适量细胞培养液;

      B组:加入等量适宜浓度的胰岛素溶液;

      C组:加入,作为对照;

      D组:加入

      ②按上述分组加入相应试剂后。将培养瓶放入CO2恒温培养箱中培养96h,用MTT法检测各组活细胞数量并记录,计算C、D组的,并得出C、D组环孢素的IC50.

    2. (2) 预测实验结果:完善下列必标图。并用曲线表示C、D组的实验结果。

    3. (3) ①患者肾脏移植后,须使用免疫抑制剂的原因是

      ②若实验中A、B组的细胞存活情况相同,说明

      ③进一步研究发现PBMC细胞中的表达量增加,说明胰岛素可能是直接作用于免疫细胞,提高了其活性。为了证明此作用,可增加一组实验组,该组的处理是

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