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高中生物学
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综合题
1.
(2022高三上·安徽月考)
某动物体内含有研究者感兴趣的目的基因,研究者欲将该基因导入大肠杆菌的质粒中保存和表达。该质粒含有氨苄青霉素抗性基因(Amp
R
)、LacZ基因及一些酶切位点,其结构和简单的操作步骤如图所示。
注:普通大肠杆菌菌落为乳白色,LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质。
请根据以上信息回答下列问题:
(1) 从动物体内获取细胞进行培养时,除了细胞需要的各种营养物质和适宜的温度、pH和渗透压外,还需要满足的环境条件有
、
。
(2) 利用PCR可以在体外扩增含该目的基因的DNA片段,其扩增循环一般可以分为
、
、
三步。
(3) 为了确保目的基因与载体的连接发生定向连接重组,以便定向克隆和成功表达,可以采用
的方法。
(4) 在完成第④步操作后,菌液中大肠杆菌分为未转化、导入空白质粒、导入重组质粒三种,它们在图中培养基中培养后的观察到的结果分别是:
、
、
。
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