1. (2022高三上·河南月考) 新冠病毒主蛋白酶（Mpro）可识别并切割新冠病毒的多聚蛋白质，以调节新冠病毒RNA的复制。研究发现Mpro在进化上高度保守，且人类缺乏其同源蛋白酶。实验小组将新冠病毒的Mpro基因连接到pET—28a载体中构建重组质粒，再将其转化到大肠杆菌细胞中，以获得纯化的Mpro，并将纯化的Mpro作为抗原免疫小鼠获得抗Mpro单克隆抗体，为研究Mpro的免疫学功能奠定基础。回答下列问题：

1. （1） 获得的新冠病毒的Mpro基因需先经过程获得相应的DNA片段，再通过技术体外扩增DNA分子，体外扩增DNA分子过程中，每一个循环需要经过三个阶段。
3. （2） 实验小组在Mpro基因序列的两端分别加入NdeⅠ和Xho Ⅰ酶切位点，再利用双酶切法将Mpro基因连接到pET—28a载体中，NdeⅠ和Xho Ⅰ酶的作用是将特定部位的两个核苷酸之间的断开，利用双酶切法构建基因表达载体的目的是。
5. （3） 纯化的Mpro作为抗原免疫小鼠获得抗Mpro单克隆抗体过程需要经过两次筛选，两次筛选方法分别为。单克隆抗体的主要优点在于。
7. （4） 已知新冠病毒含有多种抗原，且目前已出现了多种新冠病毒变异株。据题分析，为研发治疗新冠病毒的靶向药物，选择Mpro作为抗原制备抗Mpro单克隆抗体的原因是。