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高中生物学
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综合题
1.
(2022高三上·望奎月考)
如表是几种限制酶识别序列及其切割位点,图1、图2中标注了相关限制酶的切割位点,其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题:
限制酶
BamHⅠ
BclⅠ
Sau3AⅠ
HindⅢ
识别序列及切割位点
(1) 用图中质粒和目的基因构建重组质粒,应选用
两种限制酶切割,酶切后的载体和目的基因片段,通过
酶的作用形成重组质粒。为了扩增重组质粒,需将其转入处于
态的大肠杆菌中。
(2) 为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌,应在筛选平板培养基中添加
。
(3) 若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接,连接部位的6个碱基对序列为
,对该部位,这两种酶
(填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。
(4) 假设所用的酶均可将切割位点完全切开,若用Sau3AⅠ切割图1质粒,可能获得
种大小不同的DNA片段。
(5) 常用PCR技术扩增目的基因,所用的引物组成为图2中
。该PCR反应体系的主要成分应该包含扩增缓冲液(含Mg
2+
)、水、引物、模板DNA、
和
。
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