1. (2022高三上·安阳月考) 近年来，过度依赖提高养殖密度和过量投饵的养殖方式，导致出现养殖环境生态失调、病害频发、水资源浪费和污染严重等现象。益生菌能够改善水质，抑制有害菌的生长，保持微生态平衡，是水产动物防控病害的有效手段之一。研究人员从鲫鱼肠道样品中分离出具有抑菌效果的菌株，为开发适用于水产养殖的抑菌类微生态制剂提供参考。抑菌效果用指示菌（嗜水气单胞菌、哈维氏弧菌、溶藻弧菌、副溶血弧菌等有害菌）进行检验。用到LB液体培养基：蛋白胨1%、酵母膏0.5%、氯化钠0.5%、水100mL。请回答下列问题：

1. （1） LB液体培养基中的蛋白胨能为微生物提供；用高压蒸汽灭菌锅对培养基进行灭菌时，水沸腾后，待，再关闭排气阀。
3. （2） 将样品鲫鱼肠道内容物制成稀释液，接种至LB液体培养基进行富集培养，目的是；将富集培养液加至LB固体培养基平板，涂布均匀，37℃恒温培养。配制LB固体培养基时，通常需向LB液体培养基中加入；菌落长出后，常采用法将其转接种到新的平板上进一步纯化，得到初筛菌株。
5. （3） 采用打孔法测定初筛菌株的抑菌效果：吸取稀释好的菌液0.6mL加入平板；使用2.7mm的直径打孔器，在平板上垂直均匀打孔，标记菌株编号，每孔分别注入10μL菌液，培养24h。每个样品做3个平板。培养完毕，检测板上出现抑菌圈，测量，取平均值。
7. （4） 经鉴定，菌株YJ4的抑菌效果最好，为进一步验证菌株YJ4的安全性，选择健康鲫鱼80尾，随机均分为4组。实验组分别采用腹腔注射法注射0.1mL浓度分别为1×10⁹、1×10⁸和1×10⁷单位/mL的YJ4菌悬液，适宜条件下饲养7d，观察并记录实验鱼游动、摄食及死亡情况，最后剖检，观察有无病变，对照组的处理为。