1. (2022高三上·苏州期中) 脑心肌炎病毒(EMCV，其 RNA 结构如图 1)是引起人脑炎和心肌炎的病原体。为研制疫苗，科研人员按下图流程培育转基因酵母菌，来生产 EMCV 的衣壳蛋白 VP1。其中受体酵母菌是组氨酸合成缺陷型，HIS4 基因表达的酶催化组氨酸的合成，G418 是一种抗生素。请回答下列问题：

图 1-EMCV 的 RNA 结构

1. （1） 壳蛋白 VP1 的合成基因（目的基因）是将 EMCV 的 RNA 经过合成 DNA， 该过程与 DNA 复制相比，其特有的碱基配对方式为。
3. （2） 目的基因用 PCR 进行扩增，结合图 1 分析，应选用设计引物并扩增，扩增的产物转移到另一试管中进行第二阶段反应，不在同一试管完成的主要原因是。
5. （3） 直接 PCR 是一种不经核酸提取而直接使用动物或植物组织等直接进行扩增的 PCR 技术。下列叙述正确的有。

   ATaq 酶与模板 DNA 上的复制原点结合，启动 PCR 过程

   B、该方法无须进行繁琐的标本 DNA 提纯的预处理

   C、该方法变性温度为生物体内的最适温度

   D、该方法扩增原核生物 DNA 的效果可能优于真核生物

   下图是直接 PCR 和常规 PCR 的电泳图，泳道 1 最可能是PCR结果。

   

7. （4） 构建重组质粒：将 NotI 切开的载体与添加同源序列的 VP1 混合，用特定的 DNA 酶处理形成质粒--VP1 结合体（质粒 2）并导入大肠杆菌，利用大肠杆菌中的 酶等完成质粒的环化。过程③将质粒 2 导入大肠杆菌除前述目的，还能实现。
9. （5） 线性 DNA 整合到酵母细胞染色体 DNA 时，可能是单拷贝整合，也可能是多拷贝整合。过程⑦先将酵母菌培养在缺乏的培养基中，筛选获得导入目的基因的酵母菌；然后将筛选出的酵母菌接种于含 2mg·L^-1G418 的培养基中进行培养，选择生长良好的酵母菌再转接到含 4mg·L^-1G418 的培养基中继续培养，其目的是。
11. （6） 研究人员用兔抗 EMCV 血清与酵母细胞生产的 VP1 蛋白进行抗原—抗体免疫反应试验，其目的是。