1. (2022高一上·浙江期中) 阅读下列材料，回答相关问题：

在食品和医药领域实践中，对于大肠杆菌的计数有多种方法。用细菌计数板在显微镜下直接计数，可测算出样品的细菌密度，但操作复杂、对设备要求高，且耗时较长。但ATP生物发光法是一种经过简化的生物化学方法。在有氧气和ATP的条件下，荧光素酶能催化荧光素的氧化而发出荧光，如下图所示。

荧光强度可用荧光强度测定仪进行测量。因为每种微生物细胞中的ATP含量是恒定的，所以可用于微生物数量的测定。该方法能测定食品中是否存在酵母菌、霉菌或细菌细胞，灵敏度可达1个微生物/200mL 。ATP生物发光法的实施先要构建荧光强度—大肠杆菌密度函数模型。利用该函数模型和被检测样品组的荧光强度快速计算出被检测样本的菌种密度。

1. （1）

   任务Ⅰ：荧光强度－大肠杆菌函数模型的建构——利用“荧光强度测定仪”和“细菌计数板”制定荧光强度—大肠杆菌密度函数标准曲线。

   实验材料：荧光素－荧光素酶混合液，大肠杆菌样品液，荧光强度测定仪，细菌计数板（可在显微镜下对细菌直接计数的装置）。

   请根据以上提供的实验材料，完善实验思路：

   ①将大肠杆菌样品液用无菌水稀释成不同细菌密度梯度组，用测定其细菌密度；

   ②将测试管中加入等量适量的，再将上述不同大肠杆菌密度梯度组分别取样后加入测试管，后用荧光强度测定仪测定，绘制荧光强度－大肠杆菌密度标准曲线。结果如图1。

   

3. （2） 任务Ⅱ：利用ATP生物发光法测定某食品的大肠杆菌密度。

   实验材料：荧光素－荧光素酶混合液，某食品悬浮稀释液，荧光强度测定仪。

   请根据以上提供的实验材料，完善实验思路，并回答有关问题：

   实验思路：

   ①在加入等量荧光素－荧光素酶混合液的测试管中，加入一定体积的，然后用荧光强度测定仪测定荧光强度；

   ②根据思路①测定的荧光强度，利用计算出某食品悬浮液的细菌密度，换算成该食品的细菌密度。

5. （3） 结果预测和分析：

   ①利用ATP生物发光法测定细菌密度的原理是：

   a：细菌的密度可直接用计数；

   b：荧光素在ATP存在的的条件下氧化发出；ATP含量与荧光强度呈正相关，荧光强度可被荧光强度测定仪测得；

   c：每个细菌细胞中的是恒定的，所以待测液中ATP含量与样品中有关。

   ②用ATP生物发光法测定某食品悬浮稀释液时，由曲线可知，若细菌密度过低，将无法测出荧光强度，所以必须注意。