1. (2022高三下·浙江开学考) 回答下列（一）、（二）小题：

（一）回答与橘子酒制作有关的问题：

1. （1） 橘子酒是以橘子汁为原料发酵而成。在制备原料时，加入果胶酶可显著增加产量，其主要原因是。橘汁生产中的残渣果皮可用于果胶生产，通常将其提取液浓缩后再加入使之形成絮状物，然后通过、真空干燥等步骤获得果胶制品。
3. （2） 已知酒精与重铬酸钾试剂反应能产生颜色，采用光电比色法测定橘子酒中酒精含量的步骤如下：①标准曲线的制作。②样品处理。将待测酒样品通过活性炭脱色，用少量水淋洗沉淀2-3次，将在容量瓶中定容。③样品测定与计算。以为空白对照。实验过程中应使用相同光程的比色杯，若制作标准曲线时的比色杯光程大于测样液时的比色杯光程，则测出的样液中酒精含量会。
5. （3） 橘子酒发酵开始时瓶内要留1/3的空间，其目的是。
7. （4） 酵母菌是橘子酒生产中常用的菌种，将培养到某时期的酵母菌培养液制备成10^-5的稀释液进行涂布分离，接种量0.1mL，三个培养皿生长的菌落数依次为36个、32个、34个，则培养液中的酵母菌数量为个/mL。

   （二）植物被野生型农杆菌感染后会产生瘤状结构，主要原因是农杆菌的Ti质粒中含有生长素合成基因（A）、细胞分裂素合成基因（B）。黄萎病是危害棉花种植的常见疾病，科学家通过基因工程技术将抗黄萎病基因导入棉花，获得抗黄萎病棉花。如图为农杆菌Ti质粒的T-DNA区段结构示意图。据图回答问题：

   

9. （5） 构建重组Ti质粒时，需要用两种不同的限制酶切割目的基因和Ti质粒，目的是。通过农杆菌的侵染将重组DNA分子转入棉花细胞中，影响转化效率的因素除了温度、培养时间等环境因素外还有。（答出2点即可）
11. （6） 为防止农杆菌侵染植物细胞后使植物产生瘤状结构，必须把T-DNA片段上的基因（用字母表示）敲除或替换掉。
13. （7） 成功得到导入目的基因的棉花后可用植物组织培养快速繁殖，植物组织培养的方式之一是胚性细胞经过卵裂、分化、和形态建成而发育成胚。从分子水平上检测目的基因转录是否成功的方法是。
15. （8） 棉花植株在多次继代培养后可能会丧失细胞全能性的表达能力，可能是由于细胞或组织中的被打破，或细胞对的敏感性发生改变。