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  • 1. (2023高三上·河源期末) 人们发现有机磷化合物能有效抑制生物体内的乙酰胆碱酯酶,从而表现出很好的杀虫、灭鼠效果,但是有机磷化合物会严重破坏生态环境。甲基对硫磷水解酶(mph)能特异性地与有机磷化合物结合,研究人员利用转基因技术实现了大肠杆菌高效表达甲基对硫磷水解酶(mph),如图所示。请根据基因工程过程回答以下问题:

    1. (1) 构建一株具有全细胞催化活性的大肠杆菌工程菌的关键步骤是要构建pET23a-gfp-mph-r的。构建pET23a-gfp-mph-r过程中应用处理使之成为感受态细胞。研究人员不直接将目的基因mph-r导入大肠杆菌的原因是
    2. (2) 图中T7启动子的功能为。gfp作为一种融合标签,能很好地提高蛋白的表达量,因此还添加了TEV蛋白酶切位点(TEVsite),其目的是
    3. (3) 为了筛选出具有目的基因的大肠杆菌,应将常规转化后的菌液涂布到含的LB固体培养基上。
    4. (4) 测序成功的表达质粒转化大肠杆菌用SDS-PAGE电泳检测全细胞蛋白表达情况,如图所示,第4泳道为mph-r单独表达的表达情况,第5泳道为gfp单独表达的表达情况,请问:1至3泳道哪一个为融合gfp标签的mph-r蛋白?为什么?

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