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(2023·汕尾模拟)
噬菌体辅助连续进化技术(PACE)将生物分子的实验室进化与噬菌体M13的生命周期结合在一起(该噬菌体的生命周期仅为10分钟),使实验室中生物分子的进化速度提高了100 倍。该技术有望让制药业使用实验室培育出来的蛋白质、核酸等成分按需制药。
噬菌体M13的增殖依赖于pII蛋白。PACE技术,首先用某目的基因替换原来的pIII蛋白基因,构建含有目的基因的pIII蛋白缺陷型噬菌体(SP) ,然后用SP侵染培养池中的宿主E.coli (其质粒中含有与目的基因活性相关联的pIII蛋白基因)。SP必须进化出有效突变才能启动质粒上pIII蛋白基因的表达,噬菌体才能获得增殖能力并持续侵染其他宿主,从而实现连续进化(过程如图所示)。
请回答以下问题: .
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(1)
获取目的基因后,常用技术对其进行快速扩增。构建pIII 蛋白缺陷型噬菌体(SP)的遗传改造过程需要用到的工具酶有, SP侵染宿主E.coli的过程相当于基因工程基本操作程序中的。
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(2)
宿主E.coli的辅助质粒(AP) 包含有与目的基因活性相关联的plII蛋白基因,是为了对噬菌体(SP) 进行。除此之外,AP还应包含有才能驱动目的基因转录出mRNA。
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(3)
研究人员向PACE的培养池不断引流入新鲜的宿主细胞,并设置培养液流出速度稍快于宿主细胞的增殖速度,其目的是。
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